曾經(jīng)常常聽到有人問,這種細胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實這個疑問的答案可以很簡單,也可以很復(fù)雜。若是這種細胞是購自ATCC或其他的細胞庫,那很簡單,問供貨商就行了。或參考有關(guān)的文獻。Invitrogen上有一個Cell Line Database的東西,也很好用。挑選你感興趣的細胞類型,它就會顯示相應(yīng)的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等,有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染進程,很方便。Sigma上也有一個Media Expert,包括培養(yǎng)基一切成分的功用描繪、運用推介和參閱文獻等,它仍是一個解決問題的能手,關(guān)于細胞培育中的常見疑問,如細胞貼壁欠好、培養(yǎng)基變色等,它都會列出相應(yīng)的緣由,并提供解決的辦法。
如果你是準備樹立一種全新細胞的培育體系,并且找不到任何參閱,那你就得花時間自己實驗了。在MEM中培育的細胞,很能夠在DMEM或M99中成長。總之,MEM做貼壁細胞培育、RPMI 640做懸浮細胞培育是一個好的開始。你也可以購買多種培養(yǎng)基,然后花大概兩周的時間先做一個比較簡單的細胞成長試驗,然后從中挑選zui合適的。
以前大多數(shù)實驗室都是用干粉培養(yǎng)基,但是制作的過程比較麻煩,需要溶解、調(diào)節(jié)pH值,過濾,在此過程中還會發(fā)生濃度誤差,而且有些實驗室的水質(zhì)并不抱負,所以培育的效果會有差別。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會降低。可能你會覺得液體培養(yǎng)基比較貴,以前是這樣,但是現(xiàn)在不一樣了。HyClone和Invitrogen都在國內(nèi)建立了液體培養(yǎng)基的基地,和運輸?shù)某杀敬蟠笙陆担匀缃竦膬r格也比較便宜,比干粉培育基貴不了多少,而且還幫你省了過濾器和時間。
血清富含成長因子,可以推進細胞的繁衍,富含的附著因子可推進細胞的貼壁,一起還具有抗活性。血清也是礦物質(zhì)、脂類及激素的重要來源。zui常用的血清有小牛血清、重生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時間的早晚來分類的。采血時間越早,營養(yǎng)物質(zhì)越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合需求高的細胞系和克隆化培育。由于瘋牛病的原因,到目前為止,中國政府依然制止從北美洲、歐洲和日本等地區(qū)進口牛血清,因此國內(nèi)市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,或是國產(chǎn)的。