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非標記抗體酶法——酶橋法

更新時間:2015-07-15 點擊量:1735

 ?  首先用酶免疫動物,制備效價高、特異性強的抗酶抗體;
?  以二抗作橋,將抗酶抗體聯結在一抗上;
?  再將酶結合在抗酶抗體上,經顯色顯示抗原的分布
–  優點:任何抗體均未被酶標記。酶是通過免疫學原理與酶抗體結合的。避免了共價連接對抗體和酶活性的損害,提高了方法的敏感性,而且節省一抗的用量。但抗酶抗體不易純化。

幾點說明
?  一抗(假設來自種屬A)的稀釋度可大些,使抗體的兩個Fab段均與組織抗原結合。
?  二抗——橋抗體(抗種屬A的IgG抗體)應過量,使其Fab段一個與一抗結合,另一個則游離。
?  因抗酶抗體與一抗均系種屬A IgG,具有相同的抗原性,所以橋抗體游離的Fab能與抗酶抗體結合,起橋作用,將其連接在與組織抗原結合的一抗上。

非標記抗體酶法——PAP法
?   與酶橋法相似,不同的是,PAP法將酶橋法的第3、4步并為步,用PAP復合物代替;
?  PAP是離體制備的復合物(HRP--抗HRP)。
?  顯色與酶橋法相同,PAP復合物中的過氧化物酶催化底物水解,形成不溶性終產物。

PAP法評價
?  PAP法比直接法、間接法、酶橋法更敏感。特別適用于石蠟切片中微量抗原和抗原性減弱抗原的檢測。
–  缺點:步驟較多,時間較長,不適用于臨床常規檢查。
?  由于常做石蠟切片,故可用于回顧性研究。

英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調素(RGN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調素(CAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調寧蛋白2(CNN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調寧蛋白(CNN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
抗體英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調磷酸酶(CaN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 鈣調磷酸酶(CaN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 鈣調結合蛋白(CALD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T
英文名稱 Rattus norvegicus (Rat) 鈣調結合蛋白(CALD)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 規格: 48T/96T

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