結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。降鈣素ELISA試劑盒在測定時，受檢標(biāo)本（測定其中的或抗原）與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形襯抗原復(fù)合物與中的其他分開。
　　再加入酶標(biāo)記的抗原或，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定達(dá)到很高的度。
　　由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原，使用的抗體除標(biāo)記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
　　經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存，對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，降鈣素ELISA試劑盒又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進(jìn)行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示，溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預(yù)計用細(xì)胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測定，對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及應(yīng)用單位均易購置。